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TBS缓冲液的配制方法和用途
2021-08-25 10:02:50 来源: 点击:

TBS是Tris-HCl缓冲盐溶液(Tris Buffered,Saline)或缓冲生理盐水, 属于常规pH缓冲液,常用于清洗免疫染色的组织或Western Blot 中的蛋白印迹膜等,是常用分子生物学试剂。TBS缓冲液(0.05mol/L,pH7.4)主要由Tris、氯化钠、BSA、防腐剂等组成,可用于免疫金银染色中清洗组织,也可作为封闭液的基础试剂。

 

TBS缓冲液配制方法是:先以重蒸水少许溶解NaCl(3.5~9g,0.15mol/L),再加0.5mol/L Tris-HCl缓冲液100mL,最后加重蒸水至1000ml,充分摇匀使Tris终浓度为0.05mol/L。TBS常用于免疫酶技术中漂洗标本,通常还搭配去污剂Triton X-100(聚乙二醇辛基苯基醚,一种非离子型表面活性剂)一起使用。

 

1、Tris缓冲生理盐水(Tris Buffered,Saline,TBS)

试剂:0.5mol/L Tris-HCl缓冲液   100ml

NaCl              3.5~9g(0.15mol/L)

重蒸水              至1000ml

配制:先以重蒸水少许溶解NaCl,再加Tris-HCl缓冲液,最后加重蒸水至1000ml,充分摇匀使Tris终浓度为0.05mol/L。

TBS主要用于漂洗标本,常用于免疫酶技术中。

2、Tris-TBS(PBS)

试剂:Triton X-100         10ml(1%)或3ml(0.3%)

0.5mol/L Tris缓冲液(pH7.6)  1000ml(50ml)或(0.2mol/L的PB)

NaCl              8.5~9g

重蒸水              至1000ml

配制方法:先以重蒸水少许溶解NaCl后,加入Triton X-100及Tris缓冲液或(PB),最后加重蒸水至1000ml,充分摇匀。

该液常用浓度为1%及0.3%,前者主要用于漂洗标本,后者主要用于稀释血清。
 

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