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PBS缓冲液与TBS缓冲液的区别
2021-08-24 13:24:25 来源: 点击:
 PBS缓冲液与TBS缓冲液的区别


在生化实验中,应用最为广泛的缓冲液有PBS缓冲液和用Tris配制的TBS缓冲液。它们的作用都是调节反应体系的pH值,但又有各自的区别。近年来,TBS缓冲液的应用越来越多,有超过磷酸盐缓冲液的趋势。

PBS是磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline)一般作为溶剂,起溶解保护试剂的作用。它是生物化学研究中使用最为广泛的一种缓冲液,主要成分为Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl,由于Na2HPO4和KH2PO4它们有二级解离,缓冲的pH值范围很广;而NaCl和KCl主要作用为增加盐离子浓度。


Tris缓冲盐溶液简称TBS, 属于常规pH缓冲液,常用于清洗免疫染色的组织或Western Blot 中的蛋白印迹膜等,是常用的分子生物学试剂。TBS缓冲液(0.05mol/L,pH7.4)主要由Tris、氯化钠、BSA、防腐剂等组成,可用于免疫金银染色中清洗组织,亦可作为封闭液的基础试剂。

PBS磷酸缓冲盐溶液具有盐平衡、可调整的适宜pH缓冲作用,不仅狂犬病毒要用它稀释,一般的有活性的生物制剂都要用它来稀释,比如稀释血清。原因就是它蒸馏水不具有盐平衡作用,可以破坏生物蛋白的结构及生物特性;生理盐水不具有调整pH的作用,对完整的、具有活性的物质不能保证其在最适条件下参与生物反应,所以使用PBS是首选。

但是PBS缓冲液也不是万能的,有的生物活性物质需要的条件比PBS还要高,就需要在平衡缓冲液中加入更多的成分,维持最佳的条件保证生物活性物质保持其最完整的特性。

但是,在在有金属离子的溶液体系中,磷酸体系会与常见的Ca离子、Mg离子以及重金属离子缔合生成沉淀。在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中已都使用Tris缓冲液,而很少再用磷酸盐。

TBS是Tris-HCl缓冲盐溶液(Tris Buffered,Saline)或缓冲生理盐水。配制方法是:先以重蒸水少许溶解NaCl(3.5~9g,0.15mol/L),再加0.5mol/L Tris-HCl缓冲液100mL,最后加重蒸水至1000ml,充分摇匀使Tris终浓度为0.05mol/L。TBS常用于免疫酶技术中漂洗标本,通常还搭配去污剂Triton X-100(聚乙二醇辛基苯基醚,一种非离子型表面活性剂)一起使用。

 

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